Exposição a nanopartículas de dióxido de titânio durante a gravidez Alterou a microbiota intestinal materna e aumentou a glicose no sangue de rato

Resumo

Nanopartículas de dióxido de titânio (TiO ₂ NPs) foram usados ​​em todo o mundo durante décadas e as mulheres grávidas não conseguem evitar a exposição a eles. Estudos revelaram que TiO ₂ NPs podem matar muitos tipos de bactérias, mas se eles afetariam a composição da microbiota intestinal, especialmente durante a gravidez, raramente foi relatado. E também não se sabia quais efeitos adversos podem ser causados ​​a mulheres grávidas. Neste estudo, estabelecemos o modelo de exposição pré-natal de ratos para explorar os efeitos do TiO ₂ NPs na microbiota intestinal. Observamos uma tendência de aumento, mas não uma mudança significativa da diversidade alfa entre os grupos de controle e exposição no dia da gestação (GD) 10 e GD 17 durante o processo normal de gravidez. Cada ponto de tempo diferente tinha características únicas de unidades taxonômicas operacionais da microbiota intestinal (OTUs). A abundância de Ellin6075 diminuiu em GD 10 e GD 17, Clostridiales aumentou em GD 10 e Dehalobacteriaceae diminuiu em GD 17 após TiO ₂ Exposição de NPs. Uma investigação filogenética adicional de comunidades por previsão de reconstrução de estados não observados (PICRUSt) indicou que os genes relacionados ao diabetes mellitus tipo 2 foram aumentados e o metabolismo da taurina foi enfraquecido no segundo trimestre. Um estudo adicional mostrou que os níveis de glicose no sangue em jejum dos ratos aumentaram significativamente em GD 10 ( P <0,05) e GD 17 ( P <0,01) após a exposição. Nosso estudo apontou que TiO ₂ NPs induziram a alteração da microbiota intestinal durante a gravidez e aumentaram a glicemia de jejum de ratas grávidas, o que pode aumentar o risco potencial de diabetes gestacional em mulheres grávidas.

Introdução

Nanopartícula de dióxido de titânio (TiO ₂ NP) é um dos nanomateriais mais amplamente usados ​​e pode ser facilmente encontrado em protetor solar, tintas, tintas e alimentos [1, 2]. Eles podem ser facilmente liberados e entrar no corpo humano durante o uso de produtos comerciais. Notavelmente, as mulheres grávidas não podem evitar a exposição a eles. Estudos em animais mostraram que a disfunção do sistema ovariano e reprodutivo foi observada [3], e os neurotransmissores monoaminérgicos também foram prejudicados [4] quando camundongos fêmeas adultas foram expostos a TiO ₂ NPs. Além disso, complicações na gravidez e resultados adversos no nascimento também foram observados após a exposição de camundongas grávidas ao TiO ₂ NPs [5]. Todos os estudos acima indicaram que TiO ₂ NPs eram prejudiciais para fêmeas adultas, bem como para fêmeas grávidas, mas os mecanismos não eram totalmente compreendidos. Portanto, os estudos relativos precisam ser realizados para a avaliação de segurança do TiO ₂ NPs.

TiO ₂ NP é usado como uma espécie de poderoso agente antibacteriano; eles podem matar muitos tipos de bactérias, incluindo Staphylococcus aureus , Salmonella, Streptococcus mutans e assim por diante [6]. Os efeitos antibacterianos foram não seletivos, na verdade, enquanto a maioria dos estudos atuais se concentram principalmente em seus efeitos em matar bactérias prejudiciais, poucos relataram se TiO ₂ NPs matariam probióticos ou outras bactérias simbióticas e trariam efeitos adversos aos seres humanos. Estudos sobre se TiO ₂ NPs mudariam a composição normal da microbiota intestinal e causariam desvantagens para mulheres grávidas; portanto, realizamos este estudo sob a perspectiva da microbiota intestinal.

Recentemente, mais e mais pesquisas mostraram que a microbiota intestinal estava intimamente relacionada com doenças humanas, incluindo diabetes tipo 2 [7] e obesidade [8]. Os probióticos podem afetar o metabolismo de mulheres grávidas com diabetes gestacional [9] e alterar a metilação dos genes associados ao diabetes em fetos [10]. Estudos relataram que o nível de glicose plasmática aumentou quando camundongos adultos foram expostos a TiO ₂ NPs por 12 semanas [11]. Não foi relatado se a glicose no sangue de mulheres grávidas aumentaria após a exposição e se o período de exposição diminuiria.

Todos os estudos mencionados acima sugeriram que TiO ₂ NPs podem afetar a microbiota intestinal e aumentar o nível de glicose plasmática, mas nenhuma evidência direta provou a ligação entre a microbiota intestinal e o nível de glicose no sangue materno, e os mecanismos também não foram claros. Os estudos anteriores se concentram principalmente em estudos em animais adultos e nos efeitos do TiO ₂ NPs em mulheres grávidas foram meramente estudados da perspectiva da microbiota intestinal. Neste estudo, estabelecemos o modelo de exposição de gravidez de rato para explorar se a microbiota intestinal materna mudaria e como ela mudaria após as fêmeas grávidas serem expostas ao TiO ₂ NPs, e tentamos responder à questão de quais efeitos adversos seriam causados ​​às mulheres grávidas por mudanças na microbiota intestinal após TiO ₂ Exposição de NPs. Nosso estudo levantou as preocupações sobre a segurança do TiO ₂ NPs para as mulheres grávidas e revelamos os mecanismos potenciais.

Materiais e métodos

Desenho do estudo

Com base em um estudo realizado por Weir, A. e seus colegas em seres humanos [12], a rota de exposição e a dose de exposição em ratos foram determinadas. As ratas foram administradas diariamente por gavagem com 5 mg / kg de peso corporal / dia de TiO ₂ NPs do 5º ao 18º dia após a gravidez, e o progresso foi mostrado na Fig. 1a. Cada rato foi pesado antes da exposição oral e 0,5% da metilcelulose foi administrada como controle do veículo.

a O desenho experimental deste estudo. b As imagens TEM de TiO ₂ NPs, bar =50 nm. c Principais características do TiO ₂ NPs medidos ou relatados pelo fabricante foram apresentados

Animais

Os estudos em animais foram realizados com a permissão do comitê de ética. Ratos Sprague-Dawley (SD) foram adquiridos de Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd. Ratos fêmeas ( n =8, 12 semanas de idade) foram separados de ratos machos ( n =8, 14 semanas de idade), e ratos do mesmo sexo foram mantidos em uma grande gaiola. Todos os ratos foram alojados em uma condição de temperatura (22 ± 2 ° C) e umidade controlada (40-60%), com um ciclo claro / escuro de 12 horas por 1 semana de descanso. Em seguida, as ratas foram divididas aleatoriamente em grupo de controle ( n =4) e grupo de exposição ( n =4), e acasalados com machos na proporção de 1:1 em gaiolas individuais. O tampão vaginal foi observado todas as manhãs e a presença do tampão vaginal confirmou a gravidez e foi registrada como dia de gestação 0,5 (GD 0,5), e as ratas grávidas foram criadas em gaiolas separadas.

TiO ₂ Preparação e administração de NPs

TiO ₂ NP é um produto comercial adquirido da Sigma-Aldrich (13463-67-7). A solução estoque de TiO ₂ NPs foram dissolvidos em metilcelulose (0,5%) na concentração de 5 mg / ml de acordo com um estudo anterior [13] e sonicados por 30 min (100 W). O diâmetro hidrodinâmico do TiO ₂ NPs em metilcelulose foram medidos com espalhamento dinâmico de luz (DLS).

Coleta de fezes e preparação de DNA fecal total

As fezes de cada rato foram coletadas no GD 0 (antes do acasalamento), GD 10 e GD 17 com o processo de prenhez, respectivamente. As fezes foram armazenadas a -80 ° C antes que a diversidade bacteriana fosse analisada. O DNA fecal total foi extraído usando um kit Power Soil DNA (Mo Bio Laboratories, Carlsbad, Califórnia, EUA) de acordo com o protocolo do fabricante. E as concentrações de DNA foram medidas por espectrofotômetro NanoDrop (NanoDrop ™ 2000 / 2000C, EUA).

Sequenciação e análise de dados do gene 16S rRNA

O sequenciamento bacteriano dos genes 16S rRNA foi realizado com a plataforma Illumina MiSeq (Hangzhou Guhe Information and Technology Co., Ltd., Zhejiang, China). As regiões V3 e V4 do rRNA 16S bacteriano foram amplificadas com primers específicos, conforme descrito anteriormente [14]. E os DNAs foram submetidos ao sequenciamento Illumina MiSeq após amplificados e purificados. Os dados de sequenciamento foram processados ​​usando insights quantitativos em ecologia microbiana (QIIME) de acordo com estudos anteriores [15]. Os dados foram lidos e mesclados a partir de fragmentos de DNA originais, e os comprimentos de leitura foram entre 400 e 500 bp. As sequências quiméricas foram examinadas posteriormente usando QIIME se ocorrer.

Coleta de amostra de sangue e determinação de glicose no sangue

O sangue venoso em jejum de todas as ratas também foi coletado adequadamente quando as fezes foram coletadas. As amostras de sangue foram coletadas da veia caudal pela manhã, após 12 h de jejum em GD 0, GD 10 e GD 17, respectivamente. Em seguida, os níveis de glicose no sangue em jejum foram imediatamente determinados com o medidor Roche ACCU-CHEK® Performa de acordo com o protocolo do fabricante após a coleta.

Análise estatística

As análises estatísticas foram realizadas com Graphpad Prism 6; todos os dados sobre a diversidade da bactéria foram apresentados com diagramas de caixa como Média ± SE, e a significância de todos os grupos foi examinada por ANOVA de uma via seguida pelo teste de comparação múltipla de Dunnett. P <0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados e discussão

Características do TiO ₂ NPs

As principais características do TiO ₂ NPs foram medidos e apresentados antes dos estudos em animais. A Figura 1b mostrou um campo visual de TiO ₂ NPs sob microscópio eletrônico de transmissão. A morfologia do TiO ₂ NPs era quase esfera com um diâmetro primário de cerca de 21 nm. O diâmetro hidrodinâmico médio foi de cerca de 199,5 nm em solução de metilcelulose (Fig. 1c). A pureza do TiO ₂ NPs é ≥ 99,5%, e a área de superfície é de 35–65 m ² / g de acordo com o relatório do fabricante. Estudos recentes relataram que TiO de grau nano e fino ₂ poderia aumentar o nível de glicose no sangue de animais adultos após a exposição oral [11, 16], e se a glicose no sangue das mulheres grávidas seria afetada era desconhecido. Para esclarecer essa questão e os mecanismos subjacentes, estabelecemos o modelo de exposição de ratos grávidas para avaliar a toxicidade do TiO ₂ NPs e para investigar os danos às ratas grávidas.

Mais TiO ₂ partículas em produtos têm tamanho primário variando principalmente de 60 a 300 nm, a minoria (~ 20%) era <100 nm [17], enquanto estudo recente mostrou que a quantidade de TiO ₂ NPs em alguns produtos alimentícios é muito maior do que conhecíamos (~ 90%), por exemplo, goma de mascar [18]. Como se sabe, nanopartículas menores tiveram maior toxicidade [19, 20], e as fêmeas foram mais sensíveis a substratos prejudiciais durante a gravidez, portanto, a parte minoritária do TiO ₂ NPs podem trazer efeitos não negligenciáveis ​​para mulheres grávidas do que a maioria das partículas finas. Neste estudo, expusemos o modelo de rato grávida a TiO nanométrico ₂ (~ 21 nm) para estudar os riscos potenciais de TiO ₂ NPs para mulheres grávidas.

Mudanças na diversidade de bactérias durante a gravidez normal

Durante a gestação, as mulheres grávidas tornam-se mais sensíveis à exposição física e química; a fim de diminuir os efeitos da operação manual para a implantação do ovo fertilizado, o 5º dia foi escolhido como o primeiro dia de exposição após o término da implantação das blástulas. GD 17 é o último dia antes do parto e GD 10 é o meio do termo da gravidez. A dinâmica normal do microbioma intestinal durante a gravidez foi examinada usando amostras fecais de três momentos de grupos de controle (GD 0, GD 10 e GD 17). Observamos a diversidade alfa do microbioma intestinal ao longo do tempo, calculando os índices de Shannon, Simpson e Chao1, mas a diferença não foi significativa (Fig. 2a). Com base na análise de escalonamento multidimensional não métrico (NMDS), nenhuma diferença marcante também foi encontrada em amostras de diferentes pontos de tempo (Fig. 2b), o que foi consistente com estudos anteriores [21, 22]. O diagrama de Venn (Fig. 2c) mostrou as unidades taxonômicas operacionais específicas e compartilhadas (OTUs) em amostras de diferentes pontos de tempo, e as OTUs compartilhadas de três pontos de tempo (GD 0, GD 10, GD 17) em grupos de controle era 164; esses resultados indicaram que o número de OTUs específicas aumentou com o tempo durante a gravidez. Nossos resultados mostraram que a microbiota intestinal não revelou alterações significativas durante a gravidez normal, e as alterações não trarão efeitos adversos e até são benéficas para as mães. Nossos resultados sugeriram que a alteração da microbiota intestinal pode ser resultado do processo de gravidez, que pode ser causado por alterações hormonais em mulheres grávidas [23], semelhantes às alterações da flora vaginal durante a gravidez [24]. Além disso, pode ser uma pré-condição para uma gravidez normal.

Mudanças nas características da microbiota intestinal em ratos controle (não expostos) durante uma gravidez normal. a Diversidade alfa do microbioma intestinal revelada pelo índice de Shannon, Simpson e Chao1. b A diversidade beta foi revelada por análise de escalonamento multidimensional não métrico (NMDS). c Os números das unidades taxonômicas operacionais (OTUs) exclusivas e compartilhadas foram apresentadas no diagrama de Venn. D0 Ctrl significa ratos no grupo de controle antes do acasalamento, d10 Ctrl e d17 Ctrl significa ratos de controle em GD 10 e GD 17, respectivamente

Mudanças na diversidade de bactérias após exposição ao TiO ₂ NPs durante a gravidez

Estudos indicaram que a microbiota intestinal é crucial para a manutenção da situação normal de imunidade [25]; uma mudança natural da microbiota intestinal durante a gravidez normal pode regular o sistema imunológico para aceitar a implantação de óvulos fertilizados [26]. Enquanto isso, a alteração natural da microbiota intestinal durante a gravidez normal também pode ajudar as gestantes a se adaptarem às mudanças metabólicas durante a gestação. Uma vez que a alteração da microbiota intestinal exceda um “grau adequado”, podem ocorrer resultados adversos na gravidez. Portanto, analisamos as alterações da microbiota após TiO ₂ Exposição de NPs na parte seguinte. Os efeitos do TiO ₂ NPs sobre a diversidade de bactérias durante a gravidez foram avaliados através da análise de diversidade alfa e diversidade beta em GD 0, GD10 e GD17 depois que as fêmeas foram expostas a nanopartículas. Os resultados mostraram que a diversidade alfa mostrou uma tendência crescente em Shannon, e uma mudança significativa no índice de Simpson ( P <0,05) em comparação com a gravidez normal, mas nenhuma diferença em Chao1 (Fig. 3a). A análise NMDS (Fig. 3b) também não mostrou nenhuma diferença significativa, pois é na gravidez normal, mas após a exposição ao TiO ₂ NPs, as OTUs específicas nas amostras diminuíram no meio e no final da gravidez (Fig. 3c). Durante a gravidez normal, a diversidade da microbiota intestinal não teve nenhuma mudança óbvia, mas observamos uma tendência crescente da diversidade de bactérias nas fezes maternas depois que camundongos fêmeas foram expostos ao TiO ₂ NPs durante a gravidez, o que pode ser devido ao TiO ₂ NPs são um agente antibacteriano altamente eficiente e podem matar muitos tipos de bactérias; eles inibiam as bactérias dominantes no intestino e as bactérias originalmente suprimidas podiam se reproduzir sob essa condição. Estudos indicaram que a microbiota intestinal estava associada a muitas doenças, incluindo diabetes, obesidade, hipertensão [27] e câncer [28]; a ligação entre a microbiota intestinal e o diabetes gestacional também foi confirmada [29]. A razão pela qual nenhuma mudança significativa entre GD 0, GD10 e GD17 foi observada após a exposição pode ser que TiO ₂ NPs eram "relativamente seguros" ou as alterações da microbiota induzidas pelo TiO ₂ A exposição a NPs pode ser coberta pelas alterações da microbiota relacionadas à gestação.

Mudanças nas características da microbiota intestinal em ratas expostas durante a gestação. a A diversidade alfa do microbioma intestinal revelada pelo índice de Shannon, Simpson e Chao1. b A diversidade beta foi revelada por análise de NMDS. c Os números OTUs exclusivos e compartilhados foram apresentados no diagrama de Venn. Teste D0 significa amostras coletadas de ratos antes da exposição ao TiO ₂ NPs, Teste d10 e Teste d17 significam amostras coletadas de ratos expostos em GD 10 e GD 17, respectivamente

Alterações da microbiota intestinal no segundo trimestre após exposição ao TiO ₂ NPs

Para excluir os efeitos da gravidez e descobrir os efeitos independentes do TiO ₂ NPs na microbiota intestinal, comparamos as diferenças do microbioma intestinal entre o grupo controle e o grupo de tratamento usando amostras coletadas do segundo trimestre (GD 10). Nenhuma diferença significativa de diversidade alfa foi encontrada de acordo com os índices de Shannon, Simpson e Chao1 (Fig. 4a). Uma distinção notável foi observada entre os dois grupos com base na análise NMDS (Fig. 4b). A Figura 4c mostrou que a exposição de TiO ₂ NPs levaram às mudanças de algumas OTUs específicas no grupo de tratamento em comparação com o controle (Venn). Esses resultados mostraram que TiO ₂ NPs foram relativamente seguros e não induzirão disbacteriose óbvia. Mas a composição da flora, ou seja, a abundância de gêneros específicos, mudou no segundo trimestre e no final da gestação, respectivamente. Para descobrir ainda mais os riscos potenciais das mudanças que aconteceram durante a gravidez e explorar quais efeitos adversos podem ser trazidos, identificamos as mudanças funcionais da microbiota intestinal com bioinformática. Os resultados mostraram que dois biomarcadores dominantes, Ellin6075 e Clostridiales, foram encontrados pela análise LefSe (análise discriminante linear (LDA)> 2). A abundância de Ellin6075 foi diminuída e Clostridiales foi aumentada após TiO ₂ Exposição de NPs, respectivamente (Fig. 4d). Ellin6075 foi isolado em uma fazenda na Austrália, mas pouca informação estava disponível a respeito de suas características ou funções fenotípicas, então seus efeitos sobre a gravidez precisam de mais investigações. Yan e seus colegas mostraram que o Clostridium aumentou significativamente em ratos SD com obesidade [30], o que foi consistente com nossa descoberta de que Clostridiales coexistia com alto nível de glicose no sangue. Para revelar os efeitos da mudança da microbiota intestinal na gravidez, previmos as diferenças gênicas em amostras fecais usando investigação filogenética de comunidades por reconstrução de estados não observados (PICRUSt) (Fig. 4e), e descobrimos que genes sobre diabetes mellitus tipo 2 relacionam a função e as proteínas da biossíntese de lipídios foram fortalecidas no grupo de tratamento, enquanto o metabolismo da taurina e da hipotaurina foi enfraquecido. Os pesquisadores demonstraram que a microbiota intestinal pode gerar ácidos graxos de cadeia curta, incluindo ácido acético, ácido propiônico e, por sua vez, regular a glicose no sangue do hospedeiro [31]. E a alteração da taurina e da hipotaurina também estava de acordo com o fato de que a taurina poderia diminuir as concentrações de glicose no sangue materno [32].

Mudanças nas características da microbiota intestinal entre ratos controle e TiO ₂ Ratos expostos a NP em GD 10. a , b A diversidade alfa e beta do microbioma intestinal foi apresentada como índice de Shannon, Simpson e Chao1, bem como análise de NMDS. c O diagrama de Venn mostrou as características dos OTUs. d , e Biomarcadores dominantes e funções genéticas relacionadas foram encontrados por Lefse e investigação filogenética de comunidades por previsão de reconstrução de estados não observados (PICRUSt), respectivamente. D10 Ctrl significa os ratos de controle em GD 10, Teste d10 significa os ratos de exposição em GD 10

Alterações da microbiota intestinal no final da gravidez após exposição ao TiO ₂ NPs

O microbioma intestinal do final da gestação foi examinado por amostras fecais coletadas no GD17. Nenhuma diferença significativa foi encontrada na diversidade alfa (Fig. 5a). Essas amostras foram distribuídas significativamente por grupo de controle e tratamento no modelo NMDS (Fig. 5b). Conforme mostrado na Fig. 5c, o número reduzido de OTUs observados foi encontrado no grupo de tratamento. Também usamos Lefse para identificar biomarcadores potenciais. Notavelmente, como mostrado na Fig. 5d, a abundância de Ellin6075 persistiu diminuída no grupo de tratamento durante o final da gravidez (LDA> 2), e a abundância de Dehalobacteriaceae foi diminuída pela exposição a TiO ₂ NPs também (LDA> 2). Neste estágio, as alterações genéticas relacionadas ao diabetes mellitus não foram observadas, o que sugeriu que o segundo trimestre, em vez do último trimestre, era a janela sensível para TiO ₂ NPs para aumentar a glicemia materna. E o resultado estava de acordo com nosso reconhecimento clínico de que nossos médicos realizaram o teste de tolerância à glicose oral (OGTT), um diagnóstico comum de diabetes gestacional humano, para rastrear diabetes gestacional em mulheres grávidas no segundo trimestre (cerca de 26 semanas em mulheres grávidas). Os resultados mostraram que a glicose no sangue em jejum aumentou no GD 10 após as ratas grávidas expostas ao TiO ₂ NPs, e é anterior a um resultado anterior relatado (~ 12 semanas) em animais adultos [11], que comprovou o fato de que as fêmeas grávidas eram mais sensíveis do que os adultos.

Mudanças nas características da microbiota intestinal entre ratos controle e TiO ₂ Ratos expostos a NP em GD 17. a Os índices de Shannon, Simpson e Chao1 que apresentaram diversidade alfa foram comparados entre os dois grupos. b A diversidade beta foi revelada por análise de NMDS. c O diagrama de Venn mostrando os OTUs exclusivos e compartilhados em dois grupos. d Lefse encontrou os biomarcadores candidatos (LDA> 2) e as diferenças das funções dos genes foram previstas. e Os níveis de glicose no sangue em jejum de ratos foram medidos em GD 0, GD 10 e GD 17 após exposição a TiO ₂ NPs. D17 Ctrl e Teste d17 significam as ratas controle e expostas no 17º dia de gravidez, respectivamente

Os efeitos do TiO ₂ NPs sobre glicose no sangue após exposição pré-natal

A fim de provar os resultados da previsão PICRUSt, medimos a glicose no sangue em jejum dos ratos em GD10 e GD17, respectivamente. Depois que as ratas grávidas foram expostas ao TiO ₂ NPs por 12 dias (GD5 – GD17), os níveis de glicose no sangue em jejum foram medidos. Conforme mostrado na Fig. 5e, em comparação com o grupo de controle, os níveis de glicose em jejum dos ratos aumentaram significativamente em ambos GD10 ( P <0,05) e GD17 ( P <0,01) após a exposição ao TiO ₂ NPs, que estava de acordo com os relatórios anteriores de que TiO ₂ NPs podem aumentar o nível de glicose no sangue de animais adultos [11, 33]. Mas o incremento de valor entre o grupo controle e GD 17 foi relativamente pequeno (~ 0,5 mM), e não atingiu o padrão de diabetes gestacional [34]. Os resultados sugeriram que, a mãe solitária exposta ao TiO ₂ NPs durante a gravidez não são suficientes para induzir diabetes gestacional, mas o aumento da glicose no sangue pode trazer efeitos adversos para as mulheres grávidas e seus filhos. E foi relatado que a exposição materna a níveis elevados de glicose no sangue durante a gravidez pode aumentar os riscos de obesidade e tolerância anormal à glicose dos fetos [35], o que também nos lembrou que TiO ₂ NPs podem trazer riscos potenciais para a prole.

Conclusão

Nossos estudos indicaram que a exposição pré-natal de TiO ₂ NPs podem aumentar os níveis de glicose no sangue em jejum materno, e as alterações da microbiota intestinal podem ser o mecanismo subjacente. E chegamos à conclusão de que TiO ₂ NPs podem aumentar o risco de diabetes gestacional em mulheres grávidas, o que deve despertar nossas atenções.

Abreviações

DLS:

Espalhamento de luz dinâmico

GD:

Dia de gestação

LDA:

Análise discriminante linear

NMDS:

Escala multidimensional não métrica

OGTT:

Teste de tolerância oral à glicose

OTUs:

Unidades taxonômicas operacionais

PICRUSt:

Investigação filogenética de comunidades por reconstrução de estados não observados

QIIME:

Insights quantitativos sobre ecologia microbiana

SD:

Sprague-Dawley

TiO ₂ NPs:

Nanopartículas de dióxido de titânio

Um sensor de campo magnético flexível baseado em AgNWs &MNs-PDMS Tratamento de superfície de TiO2 eficiente usando Cs2CO3 para células solares Sb2S3 do tipo planar processadas em solução