Bioflavonóide direcionado ao receptor de folato Nanopartículas de quitosana carregadas com genisteína para efeito anticâncer avançado em cânceres cervicais

Resumo

Neste estudo, uma nova nanopartícula de quitosana conjugada com ácido fólico foi formulada para a entrega específica de bioflavonóide, Genisteína (GEN), às células de câncer cervical. As nanopartículas de quitosana carregadas com GEN preparadas (GCN) e GCN conjugado com ácido fólico (FGCN) apresentaram tamanho menor com um perfil de liberação controlada de fármaco. FGCN exibiu potencial de internalização aprimorado em células HeLa do que o de GCN. A internalização específica de FGCN deveu-se principalmente à afinidade do ácido fólico (AF) com FRs-α, que está presente em grande número nas células HeLa. Os resultados revelaram que o FGCN possui uma afinidade específica por células HeLa que contribuirão para o melhor tratamento. Nanoformulações marcadas com ácido fólico exibiram um efeito citotóxico superior em comparação com as formulações não direcionadas. De forma consistente, o valor de IC50 do GEN diminuiu de 33,8 para 14,6 μg / ml quando tratado com FGCN após 24 h de incubação. Os estudos de apoptose indicaram que as nanopartículas de FGCN eram então GCN ou GEN livre em termos de atividade anticâncer. No geral, os resultados revelaram que a conjugação de folato ao sistema de entrega pode ter um grande efeito na sobrevida dos cânceres cervicais, o que será benéfico para o tratamento geral do câncer.

Histórico

O câncer cervical humano é um dos cânceres mais populares na idade reprodutiva das mulheres em todo o mundo, que é resultado principalmente do papilomavírus humano (HPV) [1]. A “Agência Internacional de Pesquisa sobre o Câncer” citou a redução da defesa imunológica, tabagismo e atividade sexual irregular como as principais causas do câncer cervical [2]. Os avanços mais recentes em tecnologias médicas e diagnósticos têm um grande impacto na redução da taxa de mortalidade por câncer cervical; no entanto, essa classe de câncer ainda está aumentando em países em desenvolvimento como a China. Duas vacinas profiláticas contra o HPV (Gardasil e Cervarix) foram comercializadas para o tratamento de câncer cervical; no entanto, mostrou eficácia apenas em pacientes adultos e falhou em animar os pacientes em geral [3, 4]. Portanto, opções de tratamento como quimioterapia, cirurgia e radioterapia são usadas regularmente; no entanto, nenhum é eficaz no tratamento do câncer cervical. Foi relatado que agentes quimioterápicos ou outras moléculas pequenas melhoram a eficiência do tratamento do câncer se administrados especificamente [5].

Recentemente, os compostos naturais têm ganhado significativa atenção no tratamento do câncer por serem conhecidos por apresentarem menor toxicidade em comparação aos quimioterápicos [6]. Especialmente, os flavonóides presentes em muitas plantas relataram possuir propriedades antiinflamatórias e anticâncer. A genisteína (4 ′, 5,7-triidroxiisoflavona) (GEN) é uma isoflavona de soja potencialmente eficaz que tem recebido atenção crescente devido à sua potente propriedade anticâncer [7, 8]. Estudos revelaram que GEN inibe as proteínas tirosina quinases e NF-κB e interrompe o ciclo celular na fase G2 / M. Isso levará à regulação negativa de genes associados à proliferação celular e ao crescimento de células cancerosas [9, 10]. A parada da fase G2 / M suprime a migração e invasão das células cancerosas e induz a apoptose e morte celular [11]. No entanto, o potencial clínico do GEN foi prejudicado devido à sua solubilidade limitada (~ 1,45 μg / ml) e biodisponibilidade limitada [12]. Portanto, há uma necessidade imediata de melhorar as propriedades físico-químicas do GEN e suas propriedades anticâncer.

A aplicação da nanotecnologia na medicina está ganhando cada vez mais atenção devido à sua capacidade de melhorar as propriedades anticâncer de várias moléculas pequenas [13]. O encapsulamento do fármaco em uma nanopartícula oferece inúmeras vantagens, como alta estabilidade, aumento da carga do fármaco, maior internalização, biodistribuição favorável e farmacocinética aprimorada [14]. É importante ressaltar que as nanopartículas aumentam o efeito anticâncer do composto encapsulado por acúmulo preferencial nos tecidos tumorais. Além disso, as nanopartículas podem reverter a resistência a múltiplas drogas (MDR) das células tumorais [15, 16]. No presente estudo, empregamos nanopartículas de quitosana de origem natural devido ao seu excelente perfil de biodegradabilidade e biocompatibilidade. Além disso, o grupo amina primária da quitosana oferece algumas propriedades importantes, incluindo solubilidade aquosa e hemocompatibilidade. Além disso, o grupo amina pode ser empregado para alterar a superfície das nanopartículas [17]. A fim de aumentar a especificidade do alvo, temos ácido fólico conjugado na superfície das nanopartículas de quitosana. O ácido fólico foi selecionado como um ligante de direcionamento devido à sua superexpressão nas células do câncer cervical. Os receptores de folato estão presentes em alto ou grande número nas células do câncer cervical. Para ser específico, FRs-α está presente em células normais também, mas não está exposto à circulação sanguínea, ao passo que está altamente exposto à circulação sanguínea no caso de células cancerosas, tornando-o um alvo atraente para nanopartículas conjugadas com folato que podem ser internalizadas por endocitose mecanismos [18, 19].

No presente estudo, nosso objetivo principal foi aumentar a propriedade anticâncer de GEN em relação às células de câncer cervical HeLa superexpressas de FR-α por encapsulação em nanopartículas de quitosana conjugada com FA. As nanopartículas foram caracterizadas em termos de tamanho de partícula, forma e cinética de liberação in vitro. O efeito de direcionamento do AF foi estudado por ensaio de absorção celular em células cancerosas HeLa. O efeito anticâncer de nanopartículas carregadas com GEN e GEN foram estudados por ensaio de citotoxicidade, ensaio vivo / morto e análise de apoptose.

Métodos

Materiais

A genisteína foi adquirida da Aladdin Chemicals (Xangai, República Popular da China). O ácido fólico, quitosano (85% desacetilado), foi adquirido na Sigma-Aldrich, China. EDC e NHS também foram adquiridos da Sigma-Aldrich, China. Todos os outros produtos químicos são de grau reagente e usados sem quaisquer modificações.

Preparação de nanopartículas de quitosana conjugadas com ácido fólico carregadas com GEN

Antes de preparar nanopartículas, o conjugado de quitosana com ácido fólico foi preparado. Resumidamente, 44,1 mg de ácido fólico foram dissolvidos em DMSO juntamente com uma mistura de cloridrato de 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etil carbodiimida (EDAC.HCl) e N-hidroxi succinimida (NHS) (razão molar 1:1,5:1,5 ) A mistura foi agitada durante 30 min para permitir a ativação do grupo funcional. A solução orgânica foi adicionada gota a gota à solução de quitosano (0,5% p / p) sob agitação contínua. A agitação continuou durante a noite sob condições escuras. O pH foi ajustado para pH 8 em virtude da adição de hidróxido de sódio 1M. No final, a mistura foi centrifugada para separar o precipitado amarelo e lavada com carbonato de sódio e então dialisada novamente com água.

Para preparar nanopartículas, GEN, quitosana e conjugado de quitosana-FA (10:1) foram dissolvidos em DMSO. A solução de DMSO foi então adicionada gota a gota a uma solução de Tween 80 a 0,5% sob agitação contínua. A mistura foi agitada durante 3 h, e depois de todos os solventes terem evaporado, a suspensão foi centrifugada durante 30 min a 10.000 rpm a 4 ° C. O sobrenadante foi removido e avaliado pelo método HPLC. As amostras foram quantificadas por HPLC (LC 1100, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, EUA) usando uma coluna C-18 de fase reversa a 25 ° C. Uma fase móvel de metanol / água (60/40, v / v) foi usado como a fase móvel a uma taxa de fluxo de 1 ml / min.
$$ \ mathrm {DL} \% =\ mathrm {GEN} \ \ mathrm {quantidade} \ \ mathrm {in} \ \ mathrm {NP} / \ mathrm {Massa} \ \ mathrm {de} \ \ mathrm {NP } \ times 100 \% $$ $$ \ mathrm {EE} \% =\ mathrm {GEN} \ \ mathrm {quantidade} \ \ mathrm {in} \ \ mathrm {NP} / \ mathrm {Massa} \ \ mathrm {of} \ \ mathrm {GEN} \ times 100 \% $$

Análise de tamanho de partícula e morfologia de superfície

O tamanho de partícula e a distribuição de tamanho das nanopartículas foram observados por Malvern Mastersizer 2000 (Zetasizer Nano ZS90, Malvern Instruments Ltd., UK). As amostras foram adequadamente diluídas antes da análise. Todas as medições foram realizadas em triplicado.

A morfologia da superfície das nanopartículas foi avaliada por microscopia eletrônica de transmissão (TEM, JEM-1230, JEOL, Tóquio, Japão). Resumidamente, a dispersão de nanopartículas foi misturada com 2% de PTX e colocada na grade TEM e seca por 10 min sob radiação infravermelha baixa. As amostras foram contra-coradas com ácido fosfotungístico (2%) e observadas sob TEM a uma tensão de aceleração de 100 kV.

Estudo de liberação de drogas in vitro

O estudo de liberação do medicamento foi realizado pelo método de diálise. Resumidamente, 5 mg equivalentes de nanopartículas GEN foram suspensos em 1 ml de tampão de liberação (PBS, pH 7,4) e transferidos para um tubo de diálise (MWCO:3500). O tubo de diálise foi colocado em um tubo Falcon contendo 25 ml de tampão de liberação. O tubo Falcon foi colocado em um agitador com agitação suave a 37 ° C. Em intervalos pré-designados, o volume específico da amostra foi retirado e substituído por tampão ou meio fresco. O fármaco liberado do meio de liberação foi estudado por HPLC.

Cultura de células

A linha celular de carcinoma cervical humano (célula HeLa) foi obtida de ATCC, MS, EUA e cultivada em DMEM contendo 10% de FBS e mistura de antibióticos a 37 ° C em uma atmosfera umidificada contendo 5% de dióxido de carbono.

Captação celular

A eficiência de direcionamento das nanopartículas (GCN e FGCN) foi estudada por análise de captação celular. Neste estudo, a sonda fluorescente utilizada foi a Coumarin-6. As células foram colocadas em uma placa de 96 poços e fixadas por 24 horas. O meio de cultura foi removido e substituído por meio fresco contendo GCN e FGCN e incubado por diferentes intervalos. As células foram então lavadas com PBS, lisadas (Triton-X), centrifugadas e o sobrenadante foi coletado. O sobrenadante foi utilizado para avaliar a intensidade de fluorescência por um leitor de microplacas (GENios, Tecan, Suíça). A absorção foi medida em um comprimento de onda de excitação de 430 nm e um comprimento de onda de emissão de 485 nm.

Imagem de captação celular

Microscópio de varredura a laser confocal (Olympus Fluoview FV-1000, Tóquio, Japão) foi usado para determinar a captação celular qualitativa em células cancerosas. 2 × 10 ⁵ as células foram semeadas em uma placa de 6 poços e incubadas por 24 h. O meio foi removido e substituído por meio fresco contendo GCN e FGCN e incubado por 2 h. As células foram lavadas com PBS, fixadas e lavadas novamente. As células foram então observadas usando CLSM.

Ensaio de citotoxicidade

A eficiência de morte celular de GEN, GCN e FGCN livre foi estudada por meio do protocolo de ensaio MTT. Células HeLa em uma densidade de semeadura de 1 × 10 ⁴ as células foram colocadas em uma placa de 96 poços e fixadas por 24 horas. No dia seguinte, as células foram tratadas com GEN, GCN e FGCN livres em 100 μl de meio fresco e incubadas por 24 h. Posteriormente, a mídia foi removida e lavada duas vezes com PBS. Dez microlitros de DMEM contendo MTT (5 mg / ml) foram colocados em uma placa de 96 poços e deixados de lado por 4 h. A solução de MTT foi removida com sifão e DMSO foi adicionado para dissolver os cristais de formazan que correspondem a células vivas. A absorvância do formazan foi estudada no comprimento de onda de 570 nm usando um leitor de placas (Bio-Tek Instruments Inc., EUA). O IC50 também foi calculado usando o software GraphPad Prizm (versão 17).

Ensaio vivo / morto

Células HeLa em uma densidade de semeadura de 2 × 10 ⁵ as células foram semeadas em uma placa de 6 poços e incubadas por 24 h. No dia seguinte, as células foram tratadas com GEN, GCN e FGCN livres em 100 μl de meio fresco e incubadas por 24 h. Posteriormente, a mídia foi removida e lavada duas vezes com PBS. As células foram processadas de acordo com as instruções do fabricante (Molecular Probes, EUA). A calceína AM e o homodímero de etídio são os respectivos corantes de células vivas e mortas que são usados para a coloração.

Análise estatística

Os dados foram analisados estatisticamente usando t teste. A P valor inferior a 0,05 foi usado para mostrar significância estatística. Todas as experiências foram realizadas em triplicado.

Resultados e discussão

O câncer cervical humano é um dos cânceres mais populares na idade reprodutiva das mulheres em todo o mundo, o que resulta principalmente do papilomavírus humano. Portanto, opções de tratamento como quimioterapia, cirurgia e radioterapia são usadas regularmente; no entanto, nenhum é eficaz no tratamento do câncer cervical. Foi relatado que agentes quimioterápicos ou outras moléculas pequenas melhoram a eficiência do tratamento do câncer se administrados especificamente. Recentemente, os compostos naturais têm ganhado grande atenção no tratamento do câncer, pois são conhecidos por apresentarem menos toxicidade quando comparados aos quimioterápicos. A genisteína tem recebido maior atenção devido à sua potente propriedade anticâncer. No entanto, o potencial clínico do GEN foi prejudicado devido à sua baixa solubilidade (~ 1,43 μg / ml) e baixa biodisponibilidade. No presente estudo, nosso objetivo principal foi aumentar a propriedade anticâncer de GEN em relação às células de câncer cervical HeLa superexpressas de FR-α por encapsulação em nanopartículas de quitosana conjugada com FA (Fig. 1).

Ilustração esquemática da preparação de nanopartículas de quitosana conjugada com ácido fólico carregadas com genisteína

Caracterização físico-química do sistema de nanopartículas carregadas com GEN

O tamanho e o potencial zeta do sistema de partículas desempenham um papel crucial na internalização celular e no desempenho sistêmico de drogas anticâncer. O espalhamento dinâmico de luz (DLS) foi usado para determinar o tamanho de partícula e a distribuição de tamanho das nanopartículas carregadas com GEN (Fig. 2). O tamanho médio de partícula de GCN foi de ~ 140 nm, enquanto FGCN foi de ~ 165 nm com excelente índice de polidispersidade. O diâmetro hidrodinâmico médio do FGCN é inferior a 200 nm, o que é suficiente para penetrar nos tecidos tumorais usando permeação aumentada e efeitos de retenção. O pequeno tamanho das partículas pode resistir à propriedade de eliminação rápida das nanopartículas do corpo (RES) [20]. A carga superficial é considerada um indicador chave da estabilidade das partículas em suspensão. O potencial zeta médio de GCN foi de +26 mV, enquanto FGCN foi de +21,5 mV. Uma ligeira diminuição na carga superficial pode ser atribuída à substituição do grupo amina da quitosana. Além disso, GCN e FGCN mostraram uma alta eficiência de aprisionamento de mais de> 95%, indicando sua adequação para aplicações sistêmicas. O tamanho de partícula e o potencial zeta de FGCN permaneceram inalterados durante o armazenamento por 3 meses, indicando sua alta estabilidade de armazenamento (Fig. 3).

Microscópio eletrônico de transmissão de FGCN

Perfil de liberação in vitro de GCN e FGCN em solução salina tamponada com fosfato (pH 7,4). A quantidade de fármaco liberada foi quantificada pelo método HPLC, e o experimento foi realizado em triplicata

Análise de morfologia de superfície

A morfologia da superfície do FGCN otimizado foi caracterizada por TEM. As nanopartículas exibiram morfologia de formato esférico e uniformemente distribuídas na grade de cobre. O tamanho de partícula observado a partir da análise TEM foi consistente com a observação DLS (Fig. 4).

Análise de captação celular de GCN e FGCN em células de câncer cervical HeLa. a Análise quantitativa da captação celular de nanopartículas pelo método de fluorescência. b Análise de captação celular baseada em microscópio confocal de varredura a laser (CLSM). Coumarin-6 foi usado como uma sonda fluorescente

Cinética de liberação de drogas in vitro

A liberação de GEN de GCN e FGCN foi realizada pelo método de diálise. O PBS foi usado para realizar o estudo de liberação para simular as condições fisiológicas. Como esperado, o perfil de liberação de GCN e FGCN foram quase semelhantes. Ambas as formulações exibiram um perfil de liberação controlada para GEN e exibiram cinética de liberação monofásica. Aproximadamente 35-40% da droga foi liberada de ambos os sistemas de nanopartículas ao final de 24 h. A tendência da taxa de liberação do GEN continuou até o final do período de estudo e, finalmente, ~ 90% da droga foi liberada. A conjugação do folato na superfície influencia a baixa liberação do fármaco indicando a influência da presença do material conjugado. Foi relatado que uma liberação controlada do medicamento a partir de NP foi atribuída ao alongamento do comprimento do trajeto do medicamento até a mídia de liberação externa. No geral, uma liberação controlada do medicamento em condições de pH 7,4 sugere que grande parte do medicamento estará intacta e se acumulará nos tecidos tumorais com o tempo.

Estudo de captação celular in vitro

A concentração intracelular de GEN é muito importante para desencadear sua ação citotóxica nas células cancerosas. Portanto, o potencial de captação celular do sistema NP é muito importante do ponto de vista da eficácia terapêutica. O GCN e FGCN carregados com cumarina-6 foram incubados em células cancerosas por diferentes pontos de tempo. Ambos os sistemas NP exibiram uma captação celular dependente do tempo com captação celular máxima em 4 h. Como esperado, o FGCN direcionado ao receptor de ácido fólico exibiu um estatisticamente ( p <0,05) maior captação celular em células cancerígenas HeLa. Mais uma vez, a captação predominante de FGCN na maioria dos casos será devido à disponibilidade de FA na superfície da partícula que pode facilitar a interação do ligante com os receptores correspondentes e que está presente em grande número nas células HeLa [21].

A captação celular é posteriormente confirmada por imagens microscópicas. As células foram incubadas com formulações respeitadas e incubadas por 2 h. Como visto, alta intensidade fluorescente foi observada para células cancerosas expostas a FGCN em comparação com as células tratadas com GCN. Estes resultados indicaram que o FGCN conjugado com ácido fólico tinha uma afinidade específica para as células HeLa cancerosas devido ao reconhecimento do receptor de ligante (FA-FR-α).

Citotoxicidade In Vitro

A atividade citotóxica in vitro de GEN, GCN e FGCN em células cancerosas HeLa foi estudada pelo protocolo de ensaio MTT. Como visto, as nanoformulações de GEN foram mais eficazes em matar as células cancerosas em comparação com as do GEN livre. Todas as formulações, no entanto, exibiram um efeito citotóxico dependente da dose típico nas células cancerosas. Como esperado, as nanoformulações marcadas com ácido fólico exibiram um resultado estatístico ( p <0,05) maior efeito citotóxico em comparação com as formulações não direcionadas. O efeito anticâncer superior do FGCN foi atribuído à internalização de nanopartículas mediada por receptor específico nas células cancerosas que podem aumentar a concentração da droga no ambiente intracelular. Além disso, a capacidade das nanopartículas de controlar a liberação do composto encapsulado também contribuiu para a alta citotoxicidade do FGCN. O valor IC50 foi usado para avaliar o efeito citotóxico real das formulações nas células cancerosas. Geralmente, é a concentração necessária para matar metade das células originais. Os resultados mostraram que o valor IC50 do GEN diminuiu de 33,8 para 26,5 μg / ml quando tratado com GCN. É importante ressaltar que o valor de IC50 diminuiu para 14,6 μg / ml quando tratado com FGCN após 24 h de incubação. Foi relatado que as nanopartículas reduzem o efeito MDR e, portanto, espera-se que aumentem a eficácia anticâncer do GEN, reduzindo seu efluxo de células mediado pela glicoproteína-P. O efeito anticâncer superior do FGCN foi consistente com sua alta captação celular nas células cancerosas HeLa [22].

Análise microscópica

A análise morfológica das células cancerosas foi realizada após o tratamento com medicamentos anticâncer. As formulações foram expostas a células cancerosas e incubadas por 24 h. As células de controle eram normais e se espalharam na lamínula da placa de poços, enquanto as células diminuíram no grupo tratado com as formulações. Consistente com o ensaio de citotoxicidade, a morfologia das células cancerosas foi diferente para diferentes formulações. Como mostrado, as células tratadas com FGCN eram menos em número e morfologia arredondada, indicando a maior citotoxicidade das formulações. O GCN também induziu mudanças notáveis nas células cancerosas devido à sua captação razoavelmente maior nas células cancerosas. Os resultados revelam claramente que as nanopartículas revestidas com quitosana serão benéficas para os tratamentos de câncer cervical (Fig. 5).

Análise de citotoxicidade in vitro de GEN, GCN e FGCN em células cancerosas HeLa. As células foram tratadas com as respectivas formulações e incubadas por 24 h. ** p <0,01 é a diferença estatística entre FGCN e GEN.A

Ensaio vivo / morto

O potencial citotóxico de formulações individuais foi posteriormente estudado por ensaio de vida / morte. A quantidade de células vivas e mortas após o tratamento medicamentoso (por 24 h) foi visualizada a partir da intensidade de fluorescência verde. Calceína AM e corante de brometo de etídio são marcadores representativos de células vivas e mortas que são aplicados a células tratadas com formulações. As células vivas restantes presentes após o tratamento com drogas absorvem calceína e emitem luz fluorescente verde (488 nm). Como mostrado, as células não tratadas mostraram alta intensidade de fluorescência (fluorescência verde), e o tratamento de GEN livre também não reduziu o crescimento das células. Por outro lado, FGCN apresentou menos células vivas e maior número de células mortas (baixa intensidade de fluorescência), indicando o efeito potente. A alta taxa de morte celular do grupo tratado com FGCN foi atribuída à maior internalização de nanopartículas nas células cancerosas. O resultado é consistente com o ensaio de citotoxicidade (Fig. 6).

Análise morfológica de células cancerosas HeLa após tratamento com GEN, GCN e FGCN

Análise de apoptose

Neste estudo, projetamos um sistema exclusivo de entrega direcionado ao receptor de ácido fólico que poderia aumentar a concentração intracelular de GEN e melhorar o efeito anticâncer nas células do câncer cervical. Portanto, a fim de analisar a propriedade de indução apoptótica de GEN, GCN e FGCN NP livres, as células foram avaliadas por citometria de fluxo após coloração dupla com anexina V / PI. A Figura 7 mostra que as células tratadas com GEN livre não induziram apoptose apreciável de células cancerosas, enquanto GCN (~ 22%) foi eficaz na indução da apoptose nessas células cancerígenas. Como esperado, FGCN exibiu uma notável apoptose de células cancerosas (~ 55%), indicando seu efeito anticâncer superior. O maior efeito anticancerígeno das formulações foi devido à afinidade específica do ligando para os receptores correspondentes que, por sua vez, aumentaram a concentração do fármaco nas células cancerosas. Os resultados revelam claramente que as nanopartículas revestidas com quitosana serão benéficas para os tratamentos de câncer cervical. A plataforma de nanotecnologia para os medicamentos anticâncer aumentou a toxicidade nas células cancerosas e aumentou a eficácia terapêutica dos agentes antitumorais (Fig. 8).

Ensaio vivo / morto de células cancerosas HeLa após tratamento com GEN, GCN e FGCN. A fluorescência verde indica as células vivas

Análise de apoptose de células cancerosas HeLa após tratamento com GEN, GCN e FGCN. O citômetro de fluxo foi usado para analisar a proporção de apoptose celular. ** p <0,01 é a diferença estatística entre FGCN e GEN

Conclusões

Neste estudo, uma nova nanopartícula de quitosana conjugada com ácido fólico foi formulada para a entrega específica de bioflavonóide, Genisteína (GEN), às células de câncer cervical. FGCN exibiu potencial de internalização aprimorado em células HeLa do que o de GCN. Os resultados revelaram que o FGCN possui uma afinidade específica por células HeLa que contribuirão para o melhor tratamento. Nanoformulações marcadas com ácido fólico exibiram um efeito citotóxico superior em comparação com as formulações não direcionadas. De forma consistente, o valor IC50 do GEN diminuiu de 33,8 para 14,6 μg / ml quando tratado com FGCN após 24 h de incubação. Os estudos de apoptose indicaram que as nanopartículas de FGCN eram GCN ou GEN livre em termos de atividade anticâncer. No geral, os resultados revelaram que a conjugação de folato ao sistema de entrega pode ter um grande efeito na sobrevida dos cânceres cervicais, o que será benéfico para o tratamento geral do câncer. O estudo em modelo animal clínico será a perspectiva a próxima etapa do presente estudo.

Abreviações

EPR:: Permeação e retenção aprimoradas
FGCN:: Nanopartículas de quitosana carregadas com GEN conjugadas com ácido fólico
FR:: Receptores de folato
GCN:: Nanopartículas de quitosana carregadas com GEN
GEN:: Genistein

Efeito do confinamento nas propriedades fotofísicas de cadeias P3HT na matriz PMMA (La0.97RE0.01Yb0.02) Nanofosforos 2O2S convertidos de sulfato de hidroxila em camadas e investigação de fotoluminescência de conversão ascendente (RE =Ho, Er)

Nanomateriais

Materiais Poliméricos

biológico

Corante

Especiarias