Plasmonic ELISA para detecção sensível de biomarcadores de doenças com um leitor baseado em telefone inteligente

Resumo

A mioglobina sérica é um dos primeiros marcadores para o diagnóstico de infarto agudo do miocárdio. É, portanto, crítico desenvolver uma tecnologia de teste de ponto de atendimento para detecção de mioglobina. Neste trabalho, relatamos um imunoensaio plasmônico sensível baseado na alteração de ressonância plasmônica de superfície localizada mediada por enzimas de nanobastões de ouro para o teste de detecção de mioglobina em ponto de atendimento. Além disso, desenvolvemos um novo leitor de imunoensaio plasmônico usando o sensor de luz ambiente do smartphone para aumentar a acessibilidade e a utilidade do imunoensaio plasmônico. A faixa de detecção linear do imunoensaio plasmônico baseado em nanobastões de ouro para detecção de mioglobina foi de 0,1-1000 ng mL ⁻¹ e o limite de detecção foi de 0,057 ng mL ⁻¹ . A mioglobina nas amostras de soro também foi analisada pelo imunoensaio plasmônico. Os resultados foram significativamente correlacionados com aqueles do ensaio imunoenzimático convencional. O imunoensaio plasmônico, juntamente com um leitor baseado em smartphone, pode ser amplamente utilizado para a aplicação de teste de ponto de atendimento de infarto agudo do miocárdio, especialmente em regiões com recursos tecnológicos limitados.

Introdução

Infarto agudo do miocárdio (IAM) é o nome médico de um ataque cardíaco que ocorre quando o sangue que flui para o músculo cardíaco é interrompido abruptamente, causando danos aos tecidos [1]. Os sintomas de IAM incluem dor pós-esternal grave e persistente, arritmia, choque e insuficiência cardíaca, que pode ser fatal [2]. O IAM é uma das doenças mais comuns na Europa e na América. Aproximadamente 1.500.000 pessoas sofrem de infarto do miocárdio todos os anos somente nos EUA. Uma tendência óbvia de aumento de IAM também foi observada na China nos últimos anos, com pelo menos 500.000 novos pacientes por ano. O teste de ponto de atendimento do biomarcador é de grande importância para o monitoramento e tratamento precoce do IAM. A mioglobina sérica (Myo) aumenta em 1–2 h após um IAM e atinge o valor máximo em 6–9 h. Acredita-se que Myo seja um dos primeiros marcadores séricos para o diagnóstico precoce de IAM [3,4,5].

Recentemente, os imunoensaios plasmônicos foram desenvolvidos combinando o ensaio imunoenzimático (ELISA) tradicional e nanomateriais [6, 7]. Os imunoensaios plasmônicos têm sido amplamente utilizados em diagnósticos clínicos [8], monitoramento da poluição ambiental [9] e detecção de segurança alimentar [10]. Em comparação com outros imunoensaios, os imunoensaios plasmônicos são altamente sensíveis e permitem a leitura a olho nu sem o uso de instrumentos sofisticados. Nanopartículas de metal, como nanomateriais de ouro e prata, são comumente usadas em nanosensores plasmônicos, devido à sua excelente ressonância plasmônica de superfície localizada (LSPR). Em imunoensaios plasmônicos, o anticorpo marcado com enzima catalisa seus substratos para gerar um produto que desencadeia a agregação ou mudança de forma dos nanomateriais. O grupo de Chen [11] relatou um imunoensaio plasmônico para detecção de patógenos usando reação de hidrólise catalisada por acetilcolinesterase (AChE) para induzir a agregação de nanopartículas de ouro (AuNPs). A sensibilidade do imunoensaio plasmônico é comparável ao RT-PCR. No entanto, a agregação de AuNPs robusta, ultrarrápida e altamente estável em ensaio colorimétrico permanece um desafio devido ao procedimento de agregação de AuNPs ser dinâmico [12, 13]. Outro tipo de imunoensaio plasmônico é baseado na indução da mudança de forma das nanopartículas plasmônicas. Nanoprismas triangulares de prata (AgNPRs) com base em gravação de biossensores plasmônicos foram relatados para a detecção de biomarcadores de câncer, que usam peróxido de hidrogênio (H ₂ O ₂ ) produzida por glicose oxidase (GOx) para ataque AgNPR [14, 15]. No entanto, para testar quantitativamente um alvo molecular, instrumentos relativamente sofisticados e volumosos para medir o espectro de nanomateriais são necessários junto com os imunoensaios plasmônicos. O inconveniente associado a esses instrumentos torna-os inaplicáveis para a análise do ponto de atendimento. Portanto, há uma necessidade urgente de desenvolver um leitor de imunoensaio plasmônico portátil, barato e fácil de usar para um diagnóstico de teste de ponto de atendimento (POCT).

Nanobastões de ouro (AuNRs) têm sido amplamente adotados em biossensores [16,17,18], imagens plasmônicas [19], terapia fototérmica de tumor [20] e terapia fotodinâmica [21] devido às suas propriedades físicas, ópticas e eletrônicas únicas [22 , 23,24]. Neste trabalho, relatamos um imunoensaio plasmônico sensível com base na alteração LSPR mediada por enzimas de AuNRs para a detecção de Myo. A fim de facilitar o diagnóstico POCT de IAM, desenvolvemos um novo leitor de imunoensaio plasmônico usando o sensor de luz ambiente (ALS) de um smartphone. A alta correlação entre os resultados obtidos no imunoensaio plasmônico e os do ELISA tradicional em amostras de soro demonstrou o potencial de aplicação desse novo método para o diagnóstico precoce por POCT do IAM, principalmente em regiões com recursos tecnológicos limitados.

Materiais e métodos

Materiais e Reagentes

Myo (de tecido de coração humano) foi adquirido na Abcam (Cambridge, UK). Anticorpos anti-myo monoclonais (mAb1 e mAb2) foram produzidos em nosso laboratório (arquivo adicional 1). Nitrato de prata (AgNO ₃ , 99,8%) e boro-hidreto de sódio (NaBH ₄ ) foram adquiridos da Sinoreagent (Shanghai, China). O peróxido de hidrogênio (H ₂ O ₂ , 30% em peso) e H ₂ SO ₄ foram adquiridos da fábrica de reagentes químicos GZ (Guangzhou, China). O díodo emissor de luz (LED, 850 nm) foi adquirido a Shenzhen OCtai Co., Ltd. (Shenzhen, China). Ácido cloroáurico (HAuCl ₄ ), TMB (3,3 ', 5,5'-tet-rametilbenzidina), Tween-20 e brometo de cetiltrimetilammônio (CTAB) foram adquiridos da Amresco (Houston, TX, EUA). Glicose oxidase tipo VII de Aspergillus niger (GOx), peroxidase de rábano silvestre tipo VI (HRP) e albumina de soro bovino (BSA) foram adquiridos na Sigma-Aldrich (Saint Louis, MO, EUA). Água desionizada (grau Milli-Q, Millipore) com uma resistividade de 18,2 MΩ cm foi usada ao longo deste estudo. Amostras de soro foram coletadas no Guangzhou Overseas Chinese Hospital (Guangzhou, China).

Aparelho

Os espectros LSPR de AuNRs em placas de 96 poços foram coletados por um leitor de microplacas Synergy H1 Hybrid Multi-Mode (Bio-Tek Instruments, Inc. EUA). A absorbância do ELISA baseado em HRP foi medida a 450 nm usando um leitor de microplacas MK3 (Bio-Tek Instruments, Inc. USA). A caracterização dos AuNRs foi realizada com um microscópio eletrônico de transmissão (TEM) PHILIPS TECNAI-10 operando a uma tensão de aceleração de 120 kV. As amostras para medições de TEM foram preparadas depositando uma gota de dispersão aquosa em uma grade de cobre revestida com filmes finos de carbono, e o solvente foi removido por evaporação ao ar. Uma impressora 3D foi adquirida na SHINING 3D (Hangzhou, China). Um smartphone HUAWEI P9 (Shenzhen, China) foi escolhido como o smartphone básico para o leitor de imunoensaio plasmônico.

Projeto do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone

O design do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone foi criado com software (Solidworks 2014) e, em seguida, processado pelo software 3D star. Para configuração de impressão, o modo de impressão foi definido para qualidade e a forma de suporte foi configurada para suporte interno e externo. Um aplicativo gratuito para smartphone, Light Meter, foi utilizado para exibir os resultados medidos na tela. Neste trabalho, o leitor de imunoensaio plasmônico está rodando em um telefone Android (código aberto). Este leitor também pode ser usado no iPhone, caso o usuário tenha aplicado um software da versão iOS (Light Meter).

Síntese de AuNRs

AuNRs foram preparados por crescimento mediado por ouro de semente [25]. Preparação de semente de ouro:foi preparado boro-hidreto de sódio 0,01 M fresco em hidróxido de sódio 0,01 M. Em seguida, 600 μL de solução de borohidreto de sódio foram adicionados a um HAuCl ₄ solução (0,25 mM) em 10 mL 0,1 M CTAB sob agitação (300 rpm min ^-1 ) A cor da semente dourada mudou de esverdeado para marrom claro. Síntese de nanobastões:AgNO ₃ (70 μL, 0,1 M) solução foi adicionada a 10 mL de HAuCl ₄ solução (0,5 mM) em 0,1 M CTAB. Posteriormente, 140 μL de ácido ascórbico (0,0788 M) foram adicionados sob agitação (300 rpm min ⁻¹ ) Finalmente, 12 μL de semente de ouro foram adicionados e a solução foi misturada sob agitação (300 rpm min ⁻¹ ) por 12 h antes do uso.

Procedimento de imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs para detecção de Myo

Para o imunoensaio plasmônico, para preparar as placas de poliestireno de 96 poços com anticorpo anti-Myo 1 (Ab1), Ab1 diluído foi incubado em placas de poliestireno de 96 poços a 4 ° C durante a noite. Após três lavagens com PBST, as placas de poliestireno de 96 poços foram bloqueadas com tampão de bloqueio (1 mg mL ^-1 BSA em PBST) a 37 ° C durante 1 h. Em seguida, as placas de poliestireno de 96 poços foram lavadas três vezes com tampão de lavagem e armazenadas a -20 ° C. O anticorpo anti-Myo 2 marcado com GOx (GOx-Ab2) foi preparado seguindo os procedimentos mostrados no arquivo adicional 1.

Para a detecção de Myo, diferentes concentrações de soluções de Myo (100 μL) foram adicionadas às placas de poliestireno de 96 poços revestidas com Ab1. Após a incubação por 1 h, as placas foram lavadas três vezes com tampão PBST e, em seguida, 0,01 mg mL ⁻¹ GOx-Ab2 foi adicionado e incubado a 37 ° C por mais 1 h. Em seguida, as placas foram lavadas três vezes com tampão PBST, e 50 μL de glicose (0,5 mM) foram adicionados e incubados a 37 ° C por 30 min. Posteriormente, o sobrenadante foi misturado com 50 μL de tampão de citrato (40 mM, pH 4,0) contendo AuNRs ([Au0] 0,24 mM), CTAB (12,5 mM) e HRP (3 μM) e incubado por 30 min. O espectro LSPR correspondente dos AuNRs foi coletado por um leitor de microplaca comercial e a intensidade da luz transmitida (850 nm) dos AuNRs foi medida pelo leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone. A curva de calibração dos imunoensaios plasmônicos para Myo foi construída ajustando a intensidade da luz transmitida medida à concentração de Myo relacionada. Para a detecção de Myo, as amostras de soro foram diluídas dez vezes usando tampão PBS. Em seguida, 100 μL das amostras de soro diluídas foram adicionadas às placas de poliestireno de 96 poços revestidas com Ab1. A concentração de Myo foi testada conforme descrito acima. Cada valor apresenta a média de três repetições.

O procedimento para ELISA baseado em HRP é mostrado no arquivo adicional 1.

Método de análise de dados

A análise de regressão linear foi processada com a origem 9.0. Todos os experimentos foram repetidos três vezes independentemente. Cada valor apresenta a média de três repetições.

Resultados e discussão

Princípio do Imunoensaio baseado em AuNRs para detecção de Myo

O imunoensaio plasmônico combina o imunoensaio em sanduíche com a característica plasmônica de AuNRs. Ab1 e Ab2 foram conjugados com glicose oxidase (GOx-Ab2) (Fig. 1). Após a ligação, o Ab2 marcado com GOx poderia catalisar sua glicose de substrato para gerar ácido glucônico e peróxido de hidrogênio (H ₂ O ₂ ) O H ₂ O ₂ atua como um oxidante para gravar os AuNRs sob certa concentração de HRP e Br ^- , o que leva a uma mudança substancial para o azul no espectro SPR dos AuNRs e uma diminuição na absorvância dos AuNRs a 850 nm. No imunoensaio plasmônico, a quantidade de GOx é proporcional à concentração alvo. O grau de deslocamento para o azul no espectro SPR de AuNRs e a redução da absorvância de AuNRs em 850 nm foi positivamente correlacionado com as concentrações alvo. Os resultados do imunoensaio plasmônico podem ser qualificados usando um leitor de microplaca para medir o desvio para o azul do espectro de AuNRs SPR ou usando o leitor de smartphone para medir a mudança na absorbância de AuNRs a 850 nm.

Diagrama esquemático do imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs para detecção de Myo

Otimização do Imunoensaio Plasmônico para Detecção Myo

As concentrações de HRP e CTAB afetam diretamente os resultados detectados. Neste trabalho, AuNRs foram gravados por uma solução que continha 100 μM de H ₂ O ₂ , e diferentes concentrações de HRP e CTAB em tampão de citrato (40 mM, pH 4,0), a partir do qual o deslocamento LSPR de AuNRs foi registrado. Neste estudo, 1,5 μM HRP e 6,25 μM CTAB foram selecionados devido ao deslocamento LSPR máximo de AuNRs observado nessas concentrações (Fig. 2a). Nas concentrações otimizadas de HRP e CTAB, AuNPs foram gravados por 100 μM de H ₂ O ₂ em tampão citrato (20 mM, pH 4,0). O espectro LSPR de AuNRs foi deslocado para o azul e a absorvância de AuNRs a 850 nm diminuiu com o tempo (Fig. 2b). Após 30 min, LSPR de AuNRs estável. Portanto, 30 min foi selecionado como o tempo para H ₂ O ₂ gravação de AuNRs. AuNPs foram gravados por diferentes concentrações de H ₂ O ₂ . O espectro de AuNRs LSPR foi deslocado para o azul com H ₂ decrescente O ₂ concentração (Fig. 2c). Imagens TEM de AuNRs mostraram que com o aumento de H ₂ O ₂ concentração, a forma dos AuNRs mudou de retângulo para elipse (Fig. 2d-f). Estes resultados demonstraram que o espectro LSPR de AuNRs era dependente da concentração de H ₂ O _2.

Otimização e caracterização de AuNRs com base em imunoensaio plasmônico para detecção de Myo. a Otimização da concentração de HRP e CTAB em AuNRs com base em imunoensaio plasmônico. Diferentes linhas de cores representam diferentes concentrações de CTAB, entre as quais 6,25 mM CTAB e 1,5 μM HRP foram preferidos. b Otimização de tempo para H ₂ O ₂ decapagem AuNRs, para os quais 1,5 μM HRP, 6,25 mM CTAB e 100 μM H ₂ O ₂ contido em tampão citrato (20 mM, pH 4,0) durante 30 min. c Espectro LSPR de AuNRs com a adição de 50 μL de concentrações variáveis de H ₂ O ₂ . d - f Imagens TEM de AuNRs gravadas por diferentes concentrações de H ₂ O ₂ (0 μM, 10 μM e 100 μM) por 30 min. g Mudança LSPR de AuNRs sob diferentes concentrações de GOx. h Espectro LSPR de AuNRs na presença de GOx-Ab2 em diferentes razões de diluição. eu Mudança de espectro LSPR de AuNRs no imunoensaio plasmônico direto revestido com diferentes concentrações de Myo. Cada valor apresenta a média de três repetições

GOx pode catalisar glicose para produzir H ₂ O ₂ , que pode gravar AuNRs. Neste trabalho, glicose 0,5 mM foi catalisada por diferentes concentrações de GOx, e o H ₂ produzido O ₂ foi usado para gravar AuNRs (Fig. 2g). Quando a concentração de GOx estava em 100 pg mL ⁻¹ (6,66 × 10 ⁻¹¹ mol L ⁻¹ ), o espectro LSPR de AuNRs mostrou um óbvio deslocamento para o azul, sugerindo a alta sensibilidade do imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs. GOx foi conjugado com Ab2 e então diluído para diferentes concentrações. A atividade catalítica do GOx-Ab2 foi validada por GOx decomposto e AuNRs gravados. O espectro LSPR de AuNRs foi desviado para o azul com o aumento da concentração de GOx-Ab2 (Fig. 2h), o que indicou que GOx-Ab2 mantém uma boa atividade catalítica. Além disso, Myo foi revestido em microplacas e incubado com GOx-Ab2. Após 30 min, GOx-Ab2 foi lavado três vezes com tampão PBST. A glicose foi então adicionada ao micropoço, seguido pela adição de AuNRs à solução de glicose após 30 min. O desvio para o azul do espectro LSPR de AuNRs aumentou com o aumento da concentração de GOx-Ab2 (Fig. 2i), demonstrando que Ab2 mantém sua atividade imunológica, enquanto GOx mantém sua atividade catalítica.

Leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone para detecção Myo no local

Os imunoensaios plasmônicos comumente relatados são interpretados quantitativamente por um leitor de microplaca comercial ou um espectrômetro, o que limita sua utilidade em regiões com recursos limitados. A fim de melhorar a acessibilidade do nosso imunoensaio plasmônico, preparamos um leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone que depende do sensor de luz ambiente (ALS) de um smartphone para medir a intensidade da luz transmitida de AuNRs. Na maioria dos smartphones, ALS é uma configuração padrão usada para ajustar automaticamente a intensidade da luz da tela dependendo de várias circunstâncias. Nós relatamos anteriormente o uso de ALS em leitor de ensaio colorimétrico [26,27,28]. O princípio e as instruções para o leitor do imunoensaio plasmônico foram documentados na publicação anterior [29]. O leitor de imunoensaio plasmônico impresso em 3D consiste em duas partes:parte 1 (100 mm × 40 mm × 40 mm) pode ser fixada em um smartphone para fornecer uma fonte de luz estável alimentada por duas baterias (1,5 V) e parte 2 ( 76 mm × 13 mm × 12 mm) pode ser usado para hospedar os micropoços. Uma vez que o imunoensaio plasmônico foi concluído, o micropoço foi montado na parte 2, como mostrado na Fig. 3a, e a parte 2 foi fixada na parte 1. A parte 1 foi então anexada ao ALS do telefone inteligente. Neste projeto, o LED foi alinhado com o ALS do smartphone. Depois que a chave foi ligada, a luz do LED foi transmitida pelos AuNRs e medida pelo ALS. A intensidade da luz transmitida de cada micropoço pode ser lida ao deslizar a parte 2. Através do aplicativo Android Light Meter, os resultados medidos podem ser apresentados na tela de um smartphone. No imunoensaio plasmônico, o espectro de absorção máximo de AuNRs foi de 850 nm, e com aumento de H ₂ O ₂ concentração, a absorbância de AuNRs em 850 nm foi gradualmente diminuída. Portanto, 850 nm foi selecionado como o comprimento de onda da luz excitante do LED no leitor de imunoensaio plasmônico. O custo total do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone foi de cerca de dois dólares. Para comparar os resultados medidos do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone e os do leitor de microplaca comercial, a intensidade da luz transmitida e a absorbância de AuNRs em micropoços foram medidos. Os resultados obtidos com esses dispositivos foram ajustados e mostraram uma correlação de 99,1% (Fig. 3b), indicando que o leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone era uma ferramenta comparável em termos de precisão.

Mecanismo de leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone. a Esquema do acessório impresso em 3D do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone. A intensidade da luz transmitida de AuNRs foi medida por ALS do smartphone e o valor foi exibido em uma tela. b A correlação entre os resultados do leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone e os do leitor de microplaca comercial. Cada valor apresenta a média de três repetições

Desempenho analítico do imunoensaio plasmônico para detecção de Myo

Para o desempenho do imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs, diferentes concentrações de Myo foram analisadas. O espectro LSPR de AuNRs foi registrado por um espectrômetro comercial e a intensidade da luz transmitida do espectro LSPR de AuNRs foi medida pelo leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone. Com o aumento das concentrações de Myo, o espectro LSPR de AuNRs foi desviado para o azul e a absorvância do espectro LSPR de AuNRs diminuiu (Fig. 4a). O desvio para o azul LSPR de AuNRs foi usado para análise quantitativa da concentração de Myo. Quando a concentração de Myo estava em 0 pg mL ⁻¹ , o desvio para o azul LSPR de AuNRs foi de 0 nm. Com o aumento das concentrações de Myo, os picos LSPR de AuNRs foram deslocados para o azul (Arquivo adicional 1:Figura S1). As intensidades de luz transmitidas medidas foram utilizadas para quantificar as concentrações de Myo. A faixa de detecção linear de AuNRs com base no imunoensaio plasmônico quatificado pelo deslocamento do azul do espectro LSPR foi de 0,1-1000 ng mL ⁻¹ (Arquivo adicional 1:Figura S2-S3) com o limite de detecção em 57,81 pg mL ⁻¹ . A intensidade da luz transmitida medida de AuNRs diminuiu com o aumento das concentrações de Myo (Fig. 4b). As intensidades de luz transmitidas medidas foram utilizadas para quantificar as concentrações de Myo. A faixa de detecção linear do imunoensaio plasmônico quantificado pela intensidade da luz transmitida de AuNRs foi de 0,1-1000 ng mL ⁻¹ (Fig. 4c) com o limite de detecção em 64,13 pg mL ⁻¹ . AMI foi definido como concentração sérica de Myo superior a 90 ng mL ⁻¹ . Para a detecção de Myo em amostras clínicas, o soro foi diluído dez vezes antes da análise para melhorar a consistência dos resultados medidos.

Imunoensaio plasmônico para detecção de Myo. a Mudanças de pico LSPR de AuNRs em diferentes concentrações de Myo. b Absorbância de AuNRs para a detecção de diferentes concentrações de Myo. c Linha de calibração de imunoensaio plasmônico para detecção de Myo conforme lido por leitor baseado em smartphone. Cada valor apresenta a média de três repetições

Comparação do Imunoensaio Plasmônico e ELISA

O ELISA é uma das técnicas mais utilizadas no diagnóstico clínico. Neste trabalho, comparamos o desempenho de detecção do ELISA e do imunoensaio plasmônico para análise Myo. Os mesmos anticorpos e antígenos foram usados em ambos os métodos. A faixa de detecção linear de ELISA foi de 25-1000 ng mL ⁻¹ e o LOD foi de 22,7 ng mL ⁻¹ (Fig. 5a, Arquivo adicional 1:Figura S4). Comparado com o ELISA, o imunoensaio plasmônico foi mais sensível e exibiu uma faixa de detecção mais ampla. Além disso, para demonstrar a viabilidade do uso do imunoensaio plasmônico para aplicação clínica, o Myo em amostras de soro clínico foi medido pelo imunoensaio plasmônico e ELISA. Os resultados do imunoensaio plasmônico foram lidos por um leitor de microplaca comercial e por um leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone, respectivamente. Os resultados desses dois métodos foram bem correlacionados (Fig. 5b), indicando que o imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs poderia ser usado para o diagnóstico clínico de IAM.

Comparação do imunoensaio plasmônico e ELISA convencional para detecção de Myo. a Linha de calibração de ELISA para detecção de Myo. b Comparação do imunoensaio plasmônico e ELISA convencional em testes de amostras de soro. O eixo transversal representa os resultados do ELISA e o eixo vertical representa os resultados do imunoensaio plasmônico. Cada valor apresenta a média de três repetições

Conclusões

Aproveitando as propriedades ópticas exclusivas dos AuNRs, desenvolvemos com sucesso um imunoensaio plasmônico para detectar infarto agudo do miocárdio em amostras clínicas. Para melhorar a utilidade do imunoensaio em testes no local, preparamos um leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone que depende do ALS do smartphone para medir a intensidade da luz transmitida de AuNRs. O limite de detecção do imunoensaio plasmônico baseado em AuNRs lido pelo leitor de smartphone foi de 0,057 ng mL ⁻¹ . Este biossensor foi mais sensível que o ELISA convencional, tornando-se uma plataforma promissora para aplicações biomédicas. Além disso, ao usar o leitor de imunoensaio plasmônico baseado em smartphone, o biossensor não requer nenhum equipamento experimental sofisticado, o que o torna mais acessível em regiões com recursos limitados.

Abreviações

Ab1:: Anticorpo Anti-Myo
Ab2:: Anticorpo anti-Myo 2
AgNPRs:: Nanoprismas triangulares de prata
ALS:: Sensor de luz ambiente
AMI:: Infarto agudo do miocárdio
AuNPs:: Nanopartículas de ouro
AuNRs:: Nanobastões de ouro
ELISA:: Ensaio de imunoabsorção enzimática
GOx:: Glicose oxidase
H ₂ O ₂ :: Peróxido de hidrogênio
HRP:: Peroxidase de rábano
LSPR:: Ressonância de plasmon de superfície localizada
Myo:: Mioglobina sérica
POCT:: Teste de ponto de atendimento

Vários Comportamentos de Rejuvenescimento do Vidro Metálico à Base de Zr por Tratamento de Ciclo Criogênico com Diferentes Temperaturas de Fundição Adsorção de tetraciclina com óxido de grafeno reduzido decorado com nanopartículas de MnFe2O4

Nanomateriais

Materiais Poliméricos

biológico

Corante

Especiarias